Sterilisasi adalah proses kritis dalam lingkungan medis, laboratorium penelitian, dan industri farmasi untuk menghilangkan semua bentuk kehidupan mikroba, termasuk bakteri, virus, spora, dan jamur. Salah satu metode sterilisasi yang paling umum, andal, dan efektif adalah menggunakan autoklaf. Autoklaf memanfaatkan uap bertekanan tinggi untuk mencapai tingkat sterilitas yang diinginkan. Memahami setiap langkah dalam proses sterilisasi autoklaf sangat vital untuk memastikan keamanan dan validitas hasil kerja.
Representasi visual sederhana dari siklus autoklaf.
Autoklaf bekerja berdasarkan prinsip termodinamika, yaitu memanfaatkan uap air jenuh bertekanan. Panas kering (seperti pada oven) membutuhkan suhu yang sangat tinggi dan waktu yang lama untuk membunuh spora. Namun, uap panas memiliki daya penetrasi yang jauh lebih baik dan mampu mentransfer panas laten yang besar. Ketika uap bertemu permukaan yang lebih dingin (seperti instrumen), ia mengembun dan melepaskan energi panas yang besar, sehingga sangat efektif dalam mendegradasi protein dan asam nukleat mikroorganisme.
Proses sterilisasi yang berhasil memerlukan persiapan yang matang dan mengikuti urutan langkah yang ketat. Berikut adalah tahapan utama dalam menjalankan proses sterilisasi autoklaf:
Tahap ini menentukan keberhasilan sterilisasi. Instrumen harus dibersihkan secara menyeluruh dari semua kotoran organik (darah, jaringan, media kultur) menggunakan deterjen enzimatik. Setelah pembersihan, bilas hingga bersih dan keringkan. Instrumen yang basah akan menghambat penetrasi uap panas. Pisahkan atau buka semua wadah yang akan disterilkan (misalnya, tutup botol dibiarkan longgar).
Bahan yang disterilkan harus dikemas menggunakan bahan yang permeabel terhadap uap namun kedap terhadap kontaminasi setelah sterilisasi. Bahan umum meliputi kertas pembungkus medis khusus, kain tenun, atau kantong polipropilen. Penting untuk tidak memadatkan muatan secara berlebihan agar uap dapat bersirkulasi merata ke seluruh permukaan barang.
Muatan harus diletakkan secara longgar di dalam ruang autoklaf, memastikan ada ruang antara barang dan dinding. Hindari menumpuk muatan terlalu tinggi. Pastikan tidak ada permukaan yang saling bersentuhan yang mungkin menghalangi aliran uap. Letakkan indikator kimia atau biologi di lokasi yang sulit dijangkau uap untuk memverifikasi efektivitas siklus.
Siklus standar yang paling umum untuk peralatan laboratorium adalah pada suhu 121°C dengan tekanan 15 psi (pon per inci persegi) selama minimal 15 hingga 20 menit. Siklus ini harus mencakup tiga fase utama:
Setelah siklus selesai, biarkan tekanan turun secara alami (kecuali cairan yang memerlukan pelepasan cepat yang hati-hati). Setelah mencapai tekanan atmosfer, buka pintu autoklaf sedikit dan biarkan barang mendingin. Jangan pernah mengambil barang yang masih panas atau berkeringat. Setelah dingin, periksa indikator internal dan eksternal. Jika semua indikator menunjukkan hasil positif, simpan instrumen dalam kondisi aseptik.
Keandalan proses sterilisasi autoklaf harus diverifikasi secara rutin menggunakan tiga jenis indikator:
Penggunaan autoklaf yang benar tidak hanya membutuhkan pemahaman tentang mekanisme alat, tetapi juga kepatuhan ketat terhadap protokol persiapan dan verifikasi. Hal ini memastikan bahwa setiap instrumen atau media yang diproses benar-benar steril, sehingga mendukung keamanan pasien dan integritas penelitian ilmiah.